Identification of serologically active Helicobacter pylori antigens related to alterations in serum pepsinogen levels / Identificación de antígenos de Helicobacter pylori serológicamente activos relacionados con alteraciones en los niveles de pepsinógenos en suero

Resumen El adenocarcinoma gástrico se asocia con la infección por Helicobacter pylori. La transición a un proceso de carcinogénesis está precedida por atrofia glandular, y los niveles séricos de pepsinógeno I y II (PGI y PGII) se correlacionan con este tipo de lesiones gástricas. El objetivo del trabajo fue estudiar posibles asociaciones de los niveles de pepsinógenos (PG) en suero en relación con la frecuencia de actividad serológica hacia antígenos de H. pylori. Se utilizaron muestras de suero de pacientes con patología gástrica asociada a H. pylori (n = 26) y de individuos asintomáticos como controles (n = 37). Los antígenos seroactivos se identificaron mediante inmunoblot utilizando un extracto proteico de H. pylori. Los títulos de anticuerpos anti-H. pylori y la concentración de PG en suero se determinaron por ELISA. De los 31 antígenos seroactivos identificados, 9 presentaron una frecuencia diferencial entre ambos grupos (116,7; 68,8; 61,9; 54,9; 45,6; 38,3; 36,5; 33,8 y 30,1 kDa) y solo 3 se relacionaron con niveles alterados de PG en suero. En el grupo control, la seropositividad del antígeno de 33,8 kDa se relacionó con un aumento de PGII, mientras que el antígeno de 68,8kDa se relacionó con valores normales de PG (PGII disminuido y PGI/PGII elevado), sugiriendo que la seropositividad a este antígeno podría ser un factor protector frente a patologías gástricas. La seropositividad del antígeno de 54,9 kDa se relacionó con valores alterados de PG indicadores de inflamación y atrofia gástrica (aumento de PGII y disminución de PGI/PGII). La identificación de alteraciones séricas en los niveles de pepsinógeno relacionadas con la seropositividad a los antígenos de 33,8; 54,9 y 68,8 kDa de H. pylori sienta un precedente para futuros estudios como posibles biomarcadores serológicos pronósticos.

Celiaquía: Aprovechar el poder diagnóstico de los anticuerpos

La celiaquía es un trastorno mediado por la respuesta inmune al gluten ingerido en individuos genéticamente susceptibles. La enfermedad celíaca afecta al 1 % de la población mundial, y su incidencia se ha incrementado sustancialmente en las últimas décadas. Sin embargo, aún la enfermedad celíaca es pobremente reconocida por la comunidad médica y por la población, tanto a nivel internacional, como nacional, muchos casos permanecen subdiagnosticados. Para mejorar el diagnóstico y manejo del paciente celíaco se recomienda el uso oportuno de la serología específica de la enfermedad celíaca. De los distintos anticuerpos asociados con la enfermedad celíaca, los anticuerpos anti-transglutaminasa tisular (anti-TGt IgA) representan la primera opción diagnóstica por su elevada sensibilidad y especificidad. La prueba de anti-TGt IgA no solo permite descartar de modo confiable la celiaquía, sino funciona como filtro para la selección de pacientes tributarios de biopsia intestinal para la confirmación diagnóstica. El desarrollo de la serología ha posibilitado la aplicación de nuevas estrategias diagnósticas que obvian la biopsia intestinal al menos en algunos grupos de pacientes.

Celiac disease is a disorder mediated by the immune response to ingested gluten in genetically susceptible individuals. Celiac disease affects 1% of the world population, and its incidence has increased substantially in recent decades. However, celiac disease is still poorly recognized by the medical community and by the population, both domestic and international, many cases remain underdiagnosed. Improving the diagnosis and management of the celiac patient, the timely use of specific serology for celiac disease is recommended. Different antibodies associated with celiac disease, however, anti-tissue transglutaminase antibodies (anti-TGt IgA) represent the first diagnostic option due to their high sensitivity and specificity. The anti-TGt IgA test not only constantly rules out celiac disease, but also functions as a filter for the selection of patients eligible for intestinal biopsy for diagnostic confirmation. The development of serology has enabled the use of new diagnostic strategies that avoid intestinal biopsy, at least in some groups of patients.

Evaluación del cambio del algoritmo de diagnóstico serológico para la enfermedad de Chagas en Colombia / Evaluation of a change in the serological diagnostic algorithm for Chagas disease in Colombia / Avaliação da mudança do algoritmo de diagnóstico sorológico da doença de Chagas na Colômbia

RESUMEN Objetivo. Evaluar los efectos del cambio del algoritmo de diagnóstico serológico para la infección por T. cruzi en los Laboratorios de Salud Pública Departamentales y en el Laboratorio Nacional de Referencia de Colombia, desde una perspectiva del acceso al diagnóstico. Métodos. Se realizó un estudio descriptivo, transversal, a partir de fuentes secundarias entre el 2015 y 2021, se consolidó el número de ensayos serológicos realizados por los laboratorios. Se elaboró una encuesta para identificar beneficios y limitaciones en la implementación del nuevo algoritmo de diagnóstico serológico. Se estimaron totales, proporciones y promedios del número de pruebas comparando dos periodos diferentes. Resultados. Se analizó la información de 33 Laboratorios de Salud Pública, encontrando que el 87,9% de ellos procesaron ensayos serológicos durante el periodo analizado. El uso de las pruebas serológicas aumentó después de la publicación del nuevo lineamiento en 2017 y la capacidad de realización de la segunda prueba paso de 4 a 33 Laboratorios de Salud Pública. La ELISA de antígenos totales y de antígenos recombinantes se consolidaron como las pruebas más realizadas en Colombia después del 2017. Conclusiones. El cambio del algoritmo de diagnóstico serológico para la enfermedad de Chagas en Colombia en 2017 tuvo efectos positivos en el acceso al diagnóstico ya que facilitó el uso de la segunda prueba, esta modificación se tradujo en aumento de la cobertura diagnóstica. Los laboratorios del país tienen disponible un algoritmo sencillo, oportuno, de calidad y que podría ser implementado en casi cualquier laboratorio clínico del país.

ABSTRACT Objective. To evaluate the effects of changing the algorithm for serological diagnosis of T. cruzi infection in departmental-level public health laboratories and in the National Reference Laboratory of Colombia, from the perspective of access to diagnosis. Methods. A descriptive, cross-sectional study was carried out, based on secondary sources between 2015 and 2021, consolidating the number of serological tests carried out by the laboratories. A survey was developed to identify benefits and limitations in the implementation of the new algorithm for serological diagnosis. Totals, proportions, and averages of the number of tests were estimated by comparing two different periods. Results. Information from 33 public health laboratories was analyzed, 87.9% of which processed serological assays during the period under study. The use of serological tests increased after the publication of the new guideline in 2017, and the capacity to perform the second test increased from four to 33 public health laboratories. In absolute terms, ELISAs for antigens and recombinant antigens became the most performed tests in Colombia after 2017. Conclusions. The change in the algorithm for serological diagnosis of Chagas disease in Colombia in 2017 had positive effects on access to diagnosis since it facilitated the use of the second test. This change resulted in increased diagnostic coverage. The country's laboratories have access to a simple, timely, quality algorithm that could be implemented in almost any clinical laboratory in the country.

RESUMO Objetivo. Avaliar os efeitos da mudança do algoritmo de diagnóstico sorológico da infecção por T. cruzi nos Laboratórios Departamentais de Saúde Pública e no Laboratório Nacional de Referência da Colômbia desde a perspectiva do acesso ao diagnóstico. Métodos. Foi realizado um estudo descritivo transversal a partir de fontes secundárias do período entre 2015 e 2021, consolidando-se o número de testes sorológicos realizados pelos laboratórios. Foi desenvolvido um questionário para identificar benefícios e limitações na implementação do novo algoritmo de diagnóstico sorológico. Os totais, as proporções e as médias do número de testes foram estimados pela comparação de dois períodos diferentes. Resultados. Dados de 33 laboratórios de saúde pública foram analisados, e constatou-se que 87,9% processaram testes sorológicos durante o período analisado. O uso de testes sorológicos aumentou após a publicação das novas diretrizes em 2017, e a capacidade de realizar um segundo teste aumentou de 4 para 33 laboratórios de saúde pública. O ELISA com antígeno total e o ELISA com antígeno recombinante se consolidaram como os testes mais realizados na Colômbia após 2017. Conclusões. A mudança no algoritmo de diagnóstico sorológico da doença de Chagas na Colômbia em 2017 teve efeitos positivos no acesso ao diagnóstico, facilitando o uso do segundo teste, o que resultou em maior cobertura diagnóstica. Os laboratórios do país têm à sua disposição um algoritmo simples, oportuno e de alta qualidade que poderia ser implementado em quase todos os laboratórios clínicos do país.

Métodos diagnósticos de laboratório para coronavirus 2019 n-cov / Laboratory diagnostic methods for coronavirus 2019 n-CoV / Métodos de diagnóstico laboratorial para coronavirus 2019 n-CoV

INTRODUCCIÓN: las múltiples y desconocidas características del coronavirus 2019-nCoV causante del síndrome respiratorio agudo y de millones de muertes en todo el mundo impulsó al desarrollo rápido de técnicas y kits de diagnóstico de laboratorio basados en la amplificación de secuencias virales o en la determinación de anticuerpos en sangre, sin embargo, tras su aplicación se generaron desacuerdos entre el resultado con la verdadera positividad o negatividad de la enfermedad. OBJETIVO: a través de la siguiente revisión se busca caracterizar y valorar el uso de las técnicas moleculares y serológicas, en función de factores como la sensibilidad y especificidad, tipo de espécimen y blanco de detección. METODOLOGIA: se emplearon las bases de datos Scopus y Web of Since obteniéndose 136 artículos de los cuales 25 cumplieron los criterios de inclusión como el desarrollo, validación clínica y estandarización de la técnica, así como nuevas metodologías propuestas. RESULTADOS: 17 elementos corresponden al diagnóstico de SARS-CoV-2 por técnicas moleculares y 8 por técnicas serológicas. El mayor número de publicaciones halladas provienen de China (5) y Estados Unidos (4), países de Europa (8) y Asia (6) mientras que, en América Latina se encontraron publicaciones procedentes de Brasil (1) y Ecuador (1). CONCLUSION: en relación a lo expuesto los ensayos moleculares destacan en su alta sensibilidad y especificidad y son usadas en cualquier etapa de la enfermedad. Las pruebas serológicas por su parte se recomiendan como complemento a las pruebas moleculares así como para monitoreo de la enfermedad en lugar de único marcador diagnóstico. (AU)

INTRODUCTION: the multiple and unknown characteristics of coronavirus 2019-nCoV causing acute respiratory syndrome and millions of deaths worldwide prompted the rapid development of laboratory diagnostic techniques and kits based on the amplification of viral sequences or the determination of antibodies in blood, however, after their application disagreements were generated between the result with the true positivity or negativity of the disease. OBJECTIVE: the following review seeks to characterize and evaluate the use of molecular and serological techniques, according to factors such as sensitivity and specificity, type of specimen and detection target. METHODOLOGY: the Scopus and Web of Since databases were used, obtaining 136 articles of which 25 met the inclusion criteria such as development, clinical validation and standardization of the technique, as well as new proposed methodologies. RESULTS: 17 items correspond to the diagnosis of SARS-CoV-2 by molecular techniques and 8 by serological techniques. The greatest number of publications found came from China (5) and the United States (4), European countries (8) and Asia (6) while, in Latin America, publications were found from Brazil (1) and Ecuador (1). CONCLUSIONS: in relation to the above, molecular assays stand out for their high sensitivity and specificity and are used at any stage of the disease. Serological tests are recommended as a complement to molecular tests as well as for disease monitoring instead of being the only diagnostic marker.(AU)

INTRODUÇÃO: as características múltiplas e desconhecidas do coronavírus 2019-nCoV, causando síndrome respiratória aguda e milhões de mortes em todo o mundo, levaram ao rápido desenvolvimento de técnicas e kits de diagnóstico laboratorial baseados na amplificação de sequências virais ou na determinação de anticorpos no sangue, porém, após sua aplicação foram geradas discordâncias entre o resultado com a verdadeira positividade ou negatividade da doença. OBJETIVO: a revisão a seguir visa caracterizar e avaliar o uso de técnicas moleculares e serológicas, dependendo de fatores como sensibilidade e especificidade, tipo de espécime e alvo de detecção. METODOLOGÍA: scopus e Web of Since foram utilizados, obtendo 136 artigos dos quais 25 preenchiam os critérios de inclusão, como desenvolvimento, validação clínica e padronização da técnica, assim como novas metodologias propostas. RESULTADOS: 17 itens correspondem ao diagnóstico do SARS-CoV-2 por técnicas moleculares e 8 por técnicas serológicas. O maior número de publicações encontradas veio da China (5) e dos Estados Unidos (4), países europeus (8) e da Ásia (6) enquanto, na América Latina, foram encontradas publicações do Brasil (1) e do Equador (1). CONCLUSÕES: em relação ao acima exposto, os ensaios moleculares se destacam por sua alta sensibilidade e especificidade e são utilizados em qualquer estágio da doença. Os testes serológicos são recomendados como um complemento aos testes moleculares, bem como para o monitoramento de doenças, em vez de serem o único marcador de diagnóstico.(AU)

Diagnóstico micológico por técnicas no convencionales en el siglo XXI / Mycological diagnosis by non-conventional techniques in the 21st century

Introducción: En la actualidad las infecciones fúngicas representan un problema para la salud humana. Las infecciones causadas por especies patógenas de hongos registran un incremento constante y se ubican entre el cuarto y décimo lugar como causa de muerte, particularmente en las unidades de cuidado intensivo. Un diagnóstico adecuado y precoz impacta directamente en la morbilidad y mortalidad asociadas a estas. Objetivo: Describir las principales técnicas de diagnóstico no convencional de las enfermedades fúngicas más frecuentes, en especial las relacionadas con el diagnóstico serológico y molecular. Métodos: Se realizó una revisión de la literatura científica sobre el tema, publicada entre 2000 y 2019. Se revisaron un total de 63 trabajos. Como motores de búsqueda se emplearon Google y Google Scholar. Se revisaron las bases de datos Medline, PubMed, Science Direct, BUCea y SciELO. Análisis y síntesis de la información: Las técnicas serológicas se emplean en el diagnóstico de las micosis invasivas o sistémicas por ser fáciles, rápidas y confiables. La detección de anticuerpos tiene utilidad limitada en el diagnóstico de las micosis invasivas debido a que la respuesta puede estar retrasada, reducida o no existir en pacientes inmunocomprometidos. La detección de componentes no antigénicos liberados por los hongos durante la infección y la secuenciación de ácidos nucleicos fúngicos son otras opciones para el diagnóstico de las micosis. Conclusiones: El desarrollo biotecnológico aporta nuevas herramientas que incrementan las oportunidades de identificación de las micosis. En la actualidad se disponen de métodos basados tanto en la detección de marcadores inmunológicos como de elementos moleculares específicos. La eficacia de las herramientas no convencionales para el diagnóstico depende de la correcta combinación de estas(AU)

Introduction: Fungal infections are a current human health problem. Infections caused by pathogenic fungal species constantly increase in number, and are ranked between the fourth and tenth leading causes of death, particularly in intensive care units. Early accurate diagnosis has a direct impact on the morbidity and mortality of fungal infections. Objective: Describe the main non-conventional diagnostic techniques for the most common fungal diseases, especially those related to serological and molecular diagnosis. Methods: A review was conducted of the scientific literature about the topic published between the years 2000 and 2019. A total 63 publications were reviewed. The search engines used were Google and Google Scholar. The databases Medline, PubMed, Science Direct, BUCea and SciELO were reviewed. Data analysis and synthesis: Serological techniques are used for the diagnosis of invasive or systemic mycoses because they are easy, fast and reliable. The detection of antibodies has a limited usefulness in invasive mycosis diagnosis, for the response may be delayed, reduced or inexistent in immunocompromised patients. Detection of non-antigenic components released by fungi during infection and sequencing of fungal nucleic acids are other mycosis diagnosis options. Conclusions: Biotechnological development contributes new tools increasing mycosis identification opportunities. Methods are currently available which are based on detection of immunological markers and specific molecular elements. The efficacy of non-conventional diagnostic tools depends on their appropriate combination(AU)

Aortitis sifilítica: a propósito de un caso del sur colombiano / Syphilitic aortitis: about a case in South Colombia

Resumen Se expone el caso de una paciente de 73 años procedente y residente de Florencia, Caquetá (Colombia), con antecedentes de hipertensión arterial, que ingresa a un hospital de alta complejidad por un cuadro clínico de 3 meses de evolución consistente en dolor torácico tipo opresivo en la región anterior izquierda del tórax, no irradiado, de intensidad 8/10. En el ecocardiograma se evidencia enfermedad calcificada de la válvula aórtica con estenosis aortica grave, insuficiencia aórtica, hipertrofia del ventrículo izquierdo e insuficiencia mitral leve. Dentro de los estudios prequirúrgicos presentó VDRL con 1:4 diluciones, se confirmó el diagnóstico con el resultado de la prueba treponémica y se descartaron otras enfermedades infecciosas. Se realizó remplazo valvular con bioprótesis y tubo valvular supracoronario. En la biopsia se confirmó la valvulitis crónica cicatricial con extensas calcificaciones. Posterior a la intervención quirúrgica se dio egreso por adecuada evolución clínica.

Abstract The case of a 73-year-old female patient obtained and resident of Florencia, Caquetá (Colombia), with a history of hypertension who is admitted to a highly complex hospital due to a 3-month clinical picture of constant evolution in pain is presented. Thoracic oppressive type in the anterior region of the left thorax, non-irradiated, of intensity 8/10. The echocardiogram shows calcified aortic valve disease with severe aortic stenosis, aortic regurgitation, left ventricular hypertrophy, and mild grade mitral regurgitation. Within the pre-surgical studies, she presented VDRL with 1:4 dilutions and the diagnosis was confirmed with the result of the treponemal test and other infectious diseases were ruled out. Valvular replacement was performed with a bioprosthesis plus a supra-coronary valvular tube. In the biopsy, chronic scar valvulitis with extensive calcifications was confirmed. After the surgical intervention, discharge was performed due to adequate clinical evolution.

Seroprevalencia a Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en bovinos criollos colombianos Romosinuano y costeño con cuernos / Seroprevalence to Mycobacterium aviumsubsp. paratuberculosis in the colombian creole cattle Romosinuano and costeño con cuernos

RESUMEN Objetivo. Determinar la seroprevalencia y los factores epidemiológicos asociados a Mycobacterium avium subsp Paratuberculosis (MAP) en dos razas de bovinos criollos del centro de investigación AGROSAVIA-Turipaná. Materiales y métodos. Se realizó un estudio epidemiológico de corte transversal. Fueron muestreados 848 bovinos criollos, 403 Romosinuanos y 445 costeño con cuernos (CCC); para el diagnóstico serológico de anticuerpos se utilizó la prueba Elisa Indirecta mediante el kit comercial Parachek® de Prionics. Las variables sexo, edad, raza y tipo de hato fueron los factores epidemiológicos evaluados y correlacionados con la presencia de anticuerpos contra MAP; la asociación estadística fue determinada mediante Odds Ratio y con un modelo multivariado de regresión logística, utilizando un nivel de significancia con p<0.05. Resultados. La seroprevalencia general de los bovinos criollos a MAP fue de 2.35% (IC 95%, 1.34-3.38); sin embargo, en los Romosinuano fue de 0.74% y en los CCC fue de 3.82%, siendo las diferencias estadísticamente significativas (valor p=0.003). También, empleando un análisis univariado, fueron más afectados las hembras y los animales mayores a un año. El análisis multivariado identificó como factores epidemiológicos las variables raza y sexo. Conclusiones. En las razas criollas del centro de investigación AGROSAVIA-Turipaná, la seroprevalencia a MAP fue baja; sin embargo, en la raza CCC el riesgo de contraer la enfermedad es seis veces mayor con relación a la raza Romosinuano. Más aún, se pudo evidenciar que las hembras tienen mayor riesgo de adquirir la enfermedad.

ABSTRACT Objective. Determine the seroprevalence and epidemiological factors associated with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) in two Creole cattle breeds of the Turipaná research center -AGROSAVIA. Materials and methods. A cross-sectional epidemiological study was conducted,a total of 848 Creole bovine animals were sampled, 403 Romosinuano and 445 costeño con cuernos (CCC); for the serological diagnosis of antibodies, the Elisa Indirect test was used with the commercial kit Parachek®2 by Prionics. The variables sex, age, breed and herd type were the epidemiological factors evaluated and correlated with the presence of antibodies against MAP; the statistical association was established using the Odds Ratio and a multivariate logistic regression model, employing a significance level with p<0.05. Results. The general seroprevalence of the Creole cattle to MAP was 2.35% (95% CI, 1.34-3.38); however, in the Romosinuano it was 0.74% and in the CCC it was 3.82%, being this difference statistically significant (p=0.003). Furthermore, employing a univariate way analysis, females and animals older than one year of age were more affected. The multivariate analysis identified the breed and sex variables as epidemiological factors. Conclusions. In the Creole breeds of the AGROSAVIA-Turipaná research center, MAP seroprevalence was low; however, in the Costeño Con Cuernos breed, the risk of contracting the disease is six times higher than in the Romosinuano breed. Moreover, it was shown that females have a higher risk of acquiring the disease.

Características clínicas y epidemiológicas de pacientes con paracoccidioidomicosis diagnosticados en un hospital de Resistencia, Chaco / Clinical and epidemiological characteristics of patients with paracoccidioidomycosis diagnosed in a hospital of Resistencia, Chaco

Con el objetivo de describir las características clínico-epidemiológicas de la paracoccidioidomicosis, se realizó un estudio descriptivo de los casos diagnosticados por el Servicio de Microbiología Clínica del hospital de adultos Dr. Julio C. Perrando, de la ciudad de Resistencia (Chaco, Argentina). Entre 2011 y 2014 se detectaron 46 casos. En 2013 y 2014 se constató un incremento de la tasa de incidencia de alrededor de 4 veces con respecto a los anos anteriores. La forma crónica fue la predominante, con una media de edad de los pacientes de 53 anos. Del total de ellos, a 39 se les realizaron pruebas serológicas. En 15 de 39 casos, las pruebas serológicas fueron la única herramienta diagnóstica, mientras que en 4 de estos casos con diagnóstico microbiológico, la prueba resultó no reactiva. La inclusión de la paracoccidioidomicosis en el diagnóstico diferencial de pacientes de áreas endémicas que presentan un síndrome infeccioso inespecífico y la aplicación de las herramientas diagnósticas disponibles contribuyen al diagnóstico oportuno, así como a disminuir las secuelas de esta afección y su impacto socioeconómico.

In order to describe the clinical and epidemiological characteristics of paracoccidioidomycosis, a descriptive study of all the cases diagnosed by the Clinical Microbiology Service at Dr. Julio C. Perrando hospital in the city of Resistencia (Chaco Province, Argentina) was conducted. Between 2011 and 2014, 46 cases were detected. In the period 2013-2014, an almost 4-fold increase in the incidence rate was detected. The chronic form of the disease was predominant with an average age of 53 years. Serological tests in 39 out of 46 patients were performed. In 15 of 39 patients, serological tests were the only diagnostic tool while in 4 patients with a microbiological diagnosis serological tests were non-reactive. In patients from endemic areas with non-specific infectious syndrome it is important to include paracoccidioidomycosis in the differential diagnosis and to apply all available diagnostic tools to reach a timely diagnosis and to reduce the long-term sequelae and their socio-economic impact.

Determinación del porcentaje de pacientes con enfermedad de chagas en la Amazonía Boliviana (parte i) / Determination of the percentage of patients with chagas disease in the Bolivian Amazon (part i)

OBJETIVO: Determinar la presencia de la enfermedad de Chagas en la Amazonía Boliviana mediante diagnóstico serológico y molecular en muestras de suero y sangre de pacientes de las regiones de Riberalta, Guayaramerín y Cobija. MATERIAL Y MÉTODOS: La población de estudio consistió en 192 personas mayores de edad habitantes de las regiones de Riberalta, Guayaramerín y Cobija quienes acudieron a los centros hospitalarios para una atención médica. Para el análisis de las muestras se utilizaron técnicas serológicas ELISA, HAI, IFI y la técnica molecular de la PCR en punto final. RESULTADOS: Los resultados reflejaron un porcentaje de infección del 4,08 por ciento del total de los pacientes de Cobija; 6,67 por ciento de los pacientes de Riberalta y 7,23 por ciento de los pacientes de Guayaramerín. Del total de los participantes el 74,48 por ciento fueron mujeres mayores de 17 años de edad. Los resultados de la PCR en punto final reflejaron un porcentaje de positividad general del 0,5 por ciento; los resultados de las pruebas serológicas reflejaron un porcentaje de positividad general del 6,25 por ciento.

OBJETIVE: To determine the presence of Chagas' disease in the Bolivian Amazon by serological and molecular diagnosis in serum and blood samples from patients from Riberalta, Guayaramerin and Cobija regions. MATERIAL AND METHODS: The study population was established by 192 elderly people living in the regions of Riberalta, Guayaramerin and Cobija who went to hospital for medical care. For the analysis of the samples serological techniques ELISA, HAI, IFI and the molecular technique of the PCR in end point were used. RESULTS: The results reflected a percentage of infection of 4,08 of the patients of Cobija, 6,67 percent of the patients of Riberalta and 7,23 percent of the patients of Guayaramerin. Of the total number of participants, 74,48 percent were women older than 17 years of age. The end-point PCR results showed a general positivity percentage of 0,5 percent the results of the serological tests reflected a general positive percentage of 6,25 percent.

Diseño de una prueba diagnóstica casera para la detección de anticuerpos tipo IgG contra el virus de la hepatitis C: incorporación de la proteína de envoltura E2 y no estructural 2 (NS2) / Design of an in-house diagnostic test for IgG antibodies against hepatitis C virus detection: Incorporation of envelope protein E2 and non-structural protein 2 ( NS2)

Durante la infección por el virus de la hepatitis C (VHC), los anticuerpos específicos aparecen varias semanas posterior a la exposición, van dirigidos contra las diversas proteínas del virus incluyendo anticuerpos contra la envoltura viral (E2)y la proteína no estructural 2 (NS2). En este trabajo se diseñó un ensayo casero de ELISA que incorpora, además de NS3, NS5a, NS5b y el core, a las proteínas E2 y NS2 del VHC en sustitución de NS4, con el fin de evaluar su capacidad diagnóstica en comparación con un estuche comercial de 4ta generación. La validación de la prueba casera demostró una especificidad y sensibilidad similar a las obtenidas con el estuche comercial de 4ta generación (Biokit©), con un índice kappa igual a 0,969, al compararse con el mismo. Esto sugiere que la prueba diseñada podría utilizarse de manera segura para la detección de anticuerpos VHC específicos de tipo IgG para el diagnóstico de la hepatitis C y constituirse como una alternativa de producción nacional más económica.

During hepatitis C (HCV) infection specific antibodies appear several weeks after exposure, including viral envelope (E2) and non-structural protein 2 ( NS2). In this work we designed an in-house ELISA assay, that incorporate beside NS3, NS5a, NS5b and core, the HCVE2 and NS2 proteins in substitution of NS4, in order to evaluate its diagnostic utility as compared to a fourth generation commercial kit. The in-house test demonstrated a specificity and sensitivity similar to those obtained with the commercial kit, with a kappa index equal to 0.969, when it was compared with the 4th generation commercial kit (BioelisaBiokit ©), suggesting that our test could be used for the diagnosis of specific IgG antibodies detection against hepatitis C and to become a more economic national alternative.

Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para el control terapéutico de la infección crónica por trypanosoma cruzi / Use of the polymerase chain reaction (pcr) for the therapeutic control of chronic trypanosoma cruzi infection

En las normas actuales de tratamiento etiológico de la fase crónica tardía de la enfermedad de Chagasen Argentina, Brasil y la Organización Mundial de la Salud, se recomienda controlar la eficaciaterapéutica con pruebas serológicas y parasitológicas convencionales. Sin embargo las primerassuelen continuar positivas 10 años o más luego del tratamiento, y las segundas son, en general, debaja sensibilidad en esta etapa de la enfermedad. La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)al ser más sensible que los exámenes parasitológicos convencionales, podría informar con unacobertura mayor si hubo falla terapéutica. Hemos ofrecido tratamiento con benznidazol (5 mg/kg/día, por 60 días) a 138 pacientes de 16 a 35 años de edad, infectados crónicamente con Trypanosomacruzi. La eficacia terapéutica se controló con PCR periódicas, hemocultivo y serología convencionalen dos grupos de pacientes: uno (GT, 57 pacientes) que aceptó y cumplió el tratamiento y otro(GNT, 37 pacientes) que lo rechazó. Antes de la administración de benznidazol la PCR mostró unasensibilidad diagnóstica de 41 por ciento (57/138 pacientes) y el hemocultivo 7,2 por ciento (10/138). Sesenta mesespostratamiento el grupo GT mostró una positividad de PCR acumulada de 28,1 por ciento (16/57) y el grupoGNT 54,1 por ciento (20/37; p=0.0016). A pesar de que la sensibilidad diagnóstica de PCR es limitada, lanegatividad de pruebas repetidas con método normatizado podría evidenciar disminución de laparasitemia o probable curación en 71,9 por ciento de los pacientes tratados, lo que habría que confirmar conel seguimiento serológico...

Current norms for the etiological treatment of chronic Chagas disease, recommended by WHOor currently in force for Argentina and Brazil, advise the control of therapeutic efficacy usingconventional serological and parasitological tests. However, serology usually remains positive 10 ormore years after treatment and parasitological tests are insensitive in the chronic stage. PolymeraseChain Reaction (PCR) is more sensitive than parasitological tests and could provide earlier evidenceof therapeutic failure. We offered benznidazole treatment (5 mg/kg/day, 60 days) to 138 patients(age=16 to 35 years old), chronically infected with Trypanosoma cruzi. Therapeutic efficacy waschecked with periodic PCR, haemoculture and conventional serology in two groups of patients: One(TG) accepting and complying with treatment and the other (NTG) rejecting it. Before benznidazoleadministration, PCR displayed a diagnostic sensitivity of 41.3 percent (57/138) and haemoculture 7.2 percent(10/138). Sixty months after treatment, TG displayed a cumulated PCR positivity of 28.1 percent (16/57)and NTG 54.1 percent (20/37; p=0.0166). Even though the sensitivity of PCR is limited, repeated negativeresults of a standardized method may reveal lower parasitaemia or probable cure, in 71.9 percent of treatedpatients, to be confirmed with serological follow up...

Propuesta y evaluación de un modelo estadístico para el control de la calidad de las serologías VDRL/RPR / Proposal and evaluation of a statistical model for the quality control of veneral disease research laboratories/rapid plasma reagin serologies

Introducción: la finalidad de todo laboratorio de control de la calidad del diagnóstico serológico de sífilis es controlar su correcta realización. Objetivo: evaluar una propuesta de modelo estadístico para tabular los resultados de los laboratorios adscritos al control de la calidad de diagnóstico de serología VDRL (venereal disease research laboratories)/RPR (rapid plasma reagin) para la evaluación y atención diferenciada a estos. Métodos: se elaboró un modelo para la recogida de información de los 21 laboratorios de la red en Villa Clara durante 2006-2010 y se hicieron modificaciones hasta llegar a la versión final. Se definieron las variables sueros enviados, total discordantes, discordantes no reactivas, discordantes reactivas, envío por mes, y evaluación integral. Se establecieron criterios de estimación para cada variable. Se presenta la evaluación del modelo con la información del trimestre enero-marzo de 2011. Resultados: la propuesta permitió detectar que las principales dificultades radican en el no cumplimiento del número de sueros enviados, no se recepcionan muestras mensualmente y además se presentan resultados discordantes. El modelo resulta justo al valorar porque se utilizan criterios cuantitativos generalizados que posibilitan dar una evaluación cualitativa individualizada, y se corresponde con las técnicas evaluativas actuales que se aplican en diferentes esferas del quehacer social. Conclusiones: el modelo estadístico valorado permite la tabulación de datos desde el laboratorio provincial de control de la calidad, a través de las variables propuestas y así evaluar a cada laboratorio

Introduction: the purpose of every quality control laboratory for the serological diagnosis of syphilis is to monitor the accuracy of test performance. Objective: to evaluate the proposal of a statistical model to tabulate the results of the laboratories involved in the quality control of the veneral disease research laboratories-rapid plasma reagin serology for the assessment of and customized attention to them. Methods: a model for the collection of information from the 21 laboratories of Villa Clara's provincial network in the 2006-2010 period was designed and refined until the final version was reached. The defined variables comprised Number of sent sera, Total discordant, Nonreactive Discordant, Reactive Discordant, Shipping by month and Final evaluation were defined. Evaluation criteria were set for each variable. This paper presented the evaluation of the model with information from January to March, 2011. Results: the suggested model allowed the detection of the main difficulties such as the non-compliance with the number of sent sera, non-reception of samples monthly and also current conflicting results. The model is fair when making evaluation, since it uses generalized quantitative criteria that enable individualized qualitative assessment and it is also in line with current evaluative techniques applied in different fields of social endeavor. Conclusions: the statistical model allows provincial quality control laboratory to tabulate data by using the suggested variables and thus evaluate each laboratory in Villa Clara

Infección por Helicobacter pylori en pacientes dispépticos y en pacientes VIH+ / Helicobacter pylori infection in dyspeptic and HIV+ patients

OBJETIVO: Relacionar la infección por Helicobacter pylori en pacientes dispépticos y en pacientes VIH+. MÉTODOS: El total de pacientes estudiados fue 60. Se empleó la técnica Microwell ELISA para la determinación IgG, utilizando el test de H. pylori de Biomerieux. La causa de las endoscopias en el 100 por ciento fue epigastralgias. La edad promedio fue de 43,5 años y predominó el sexo masculino 40 (66,6 por ciento). RESULTADOS: De acuerdo con el diagnóstico endoscópico se obtuvieron los resultados siguientes: úlcera duodenal 0 (0,00) / 5 (16,13 por ciento), úlcera gástrica 2 (6,90 por ciento) / 2 (6,45), dispepsia no ulcerosa 51, incluyendo gastritis crónica 27 (93,1) / 24 (77,42). La serología en pacientes VHI+ fue: IgG + 15 (51,72 por ciento) IgG 14 (48,28 por ciento) para un total de 29 (100 por ciento), en pacientes HIV fue: IgG + 19 (61,29 por ciento) IgG 12 (38,71 por ciento) para un total de 31 (100 por ciento). Los niveles de los linfocitos TCD 4+/mm³: Total VIH + 28 (100 por ciento) y para IGg + a Helicobacter pylori 14 (100). CONCLUSIONES: Se confirma la urgente necesidad de continuar estos estudios con diseños poblacionales más amplios, así como en el futuro buscar soluciones al problema con terapias más efectivas y con vacunas

OBJECTIVE: The objective of present study was to relate the Helicobacter pylori infection in dyspepsia patients and in HIV+ patients. METHODS: The total of study patients was 60. We used the Microwell ELISA technique to determine the IgG by Biomerieux H. pylori. Endoscopy reason in the 100 percent of patients was a epigastralgia. The mean age was 43,5 years with predominance of male sex (66.6 percent). RESULTS: According to the endoscopic diagnosis the following results were achieved: duodenal ulcer 0 (0.00)/5 (16.13 percent), gastric ulcers (6.90 percent) / 2 (6.45), non-ulcerous dyspepsia 51, including chronic gastritis 27 (93.1)/24 (77.42). The serology in HIV+ patients was: IgG + 15 (51.72 percent) IgG 14 (48.28 percent) for a total of 29 (100 percent) in HIV- was: IgG + 19 (61.29 percent IgG- 12 (38.71 percent) for a total of 31 (100 percent). TCD lymphocyte levels 4+/mm 3: Total of HIV + 28 (100 percent) and for IgG + Helicobactger pylori 14 (100 percent). CONCLUSIONS: There is a urgent need of continue these studies using broaden population designs, as well as in the future to seek solutions for the problem related to more effective therapies and with vaccines

Búsqueda activa de casos de leishmaniasis visceral zoonótica en población infantil indígena y canina colombiana / An active search for cases of zoonotic visceral leishmaniasis in indigenous Colombian children and the canine population

Objetivos Realizar la búsqueda activa de casos humanos y caninos de leishmaniasis visceral zoonótica (LVZ) mediante la determinación de anticuerpos IgG contra Leishmania infantum por la técnica de Inmunofluorescencia indirecta (IFAT) en una zona endémica colombiana y evaluar factores de riesgo relacionados con la presentación de la enfermedad. Métodos Un total de 580 niños indígenas menores de cinco años y 270 perros criollos localizados en cinco veredas del municipio de Coyaima (Tolima), fueron evaluaos por medio de la determinación de anticuerpos, usando como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B. Así mismo, se aplicó una encuesta a 527 viviendas del área de estudio para evaluar factores de riesgo y medidas de protección. Resultados No se presentó seroreactividad de la población infantil ante antígenos totales de L. infantum por la prueba IFAT. La frecuencia de anticuerpos anti IgG contra L. infantum en caninos fue del 31,5 por ciento (185/270). Se detectaron deficiencias en las condiciones de saneamiento básico de las viviendas. Se evidenció el uso de toldillos impregnados con insecticidas en el 48 por ciento (130/270) de las viviendas, pobre conocimiento de la enfermedad y baja demanda de los servicios médicos tradicio-nales (45,1 por ciento). Conclusiones Teniendo en cuenta la importancia de los caninos en el ciclo de transmisión de la LVZ es necesario fortalecer las medidas de control para interrumpir la cadena de transmisión reservorio-vector-humano, evaluar las estrategias de pro-moción en hábitos protectores desarrolladas por las autoridades sanitarias y mejorar las condiciones de vida y ambientales de la población susceptible.

Objectives Carrying out an active search for cases of canine and human zoonotic visceral leishmaniasis (LVZ) by determining IgG antibodies against Leishmania infantum by indirect immunofluorescence (IFAT) and assessing the risk factors associated with the disease occurring in a Colombian endemic area. Methods 580 indigenous children aged less than five and 270 cross-bred dogs from 5 rural areas near the town of Coyaima (Tolima) were evaluated by determining their antibodies using the Colombian Leishmania infantum (infantum) MOHOM/ COL/CLO44B strain as antigen. 527 households in the area were sur-veyed to assess the risk factors and protective measures being taken. Results No sero reactivity to Leishmania infantum antigens by IFAT test was observed in the child population. Leishmania infantum antibodies were observed in 68.5 percent of the dogs (185/270). The survey found deficiencies in the housing's sanitary conditions. The use of in-secticide-impregnated bed-nets was evident in 48 percent (130/270) of the dwellings, as were poor knowledge of the disease and a low demand for traditional medical services (41.5 percent). Conclusions Control measures must be strengthened for interrupting the reservoir- vector-human transmission chain, evaluating health authorities' strategies for promoting protective habits and improving living conditions and the susceptible population's envi-ronment.

Evaluación de un nuevo inmunoensayo para detectar anticuerpos contra el virus de la hepatitis C / Evaluation of new immunoassay for detection of antibodies against hepatitis C virus

Se evaluó el desempeño de un nuevo inmunoensayo de tercera generación para la detección de anticuerpos contra el virus de la Hepatitis C, HCV ELISA 3ª generación (Wiener-lab. Rosario. Argentina). Este equipo presenta reactivos coloreados para permitir el monitoreo de adición de muestras y control de procesos. Se evaluó la sensibilidad, especificidad y precisión de HCV ELISA 3ª generación mediante 5 paneles de seroconversión, 8 paneles de desempeño, 1 panel de sensibilidad para diferentes genotipos de HCV, 23 muestras de pacientes infectados con diferentes genotipos de HCV, 546 muestras de pacientes infectados, 556 muestras que contenían interferentes potenciales y 3.024 muestras de individuos no infectados. La sensibilidad en paneles de desempeño y en pacientes infectados fue 99,72%, y en muestras de pacientes infectados con diferentes genotipos fue 100%. La especificidad obtenida en muestras de donantes de sangre y Centros de Salud fue 99,50%. Finalmente, en los estudios de precisión se observó un coeficiente de variación intraensayo menor al 10%, e interensayo menor al 15% para muestras reactivas débiles. HCV ELISA 3ª generación, desarrollado por Wiener-lab, presenta un desempeño adecuado para el diagnóstico de la infección por HCV en el laboratorio serológico y en el tamizaje de donantes de sangre.

The performance of a new third-generation Anti-HCV, HCV ELISA third-generation (Wiener-lab. Rosario. Argentina), was evaluated. This kit presents sample addition monitoring and process control. Sensibility, specificity and precision of HCV ELISA 3ª generation were evaluated by means of 5 seroconversion panels, 8 performance panels, 1 worldwide HCV performance panel (which includes different HCV genotypes), on 546 samples of patients infected with HCV, 556 samples containing potentially interfering substances, and 3024 samples of persons not infected with HCV. Sensibility was 99.72% on performance panels and samples of HCV infected patients, and 100% on samples of patients infected with different genotypes. The specificity obtained from samples from blood donors and health centers was 99.50%. Finally, in precision studies the intra-assay coefficient of variation found was smaller than 10% and the inter-assay CV was smaller than 15% for weak reactive samples. In summary, HCV ELISA 3ª generation developed by Wiener-lab presents an adequate performance for the diagnosis of hepatitis C virus infection in clinical laboratory and blood donations screening.

Leishmaniasis Visceral Canina: pruebas diagnósticas no identifican Estados Reales de la infección / Canine Visceral Leishmaniasis: diagnostic tests do not detect real state of the infection

Objetivos Establecer la capacidad de las pruebas serológicas de Inmunofluorescencia indirecta (IFAT) e Inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA), para detectar el estado real de la infección en leishmaniasis visceral canina (LVC). Métodos Un total de 211 perros criollos localizados en el sur del Departamento del Tolima, zona endémica para la leishmaniasis visceral, fueron evaluados por medio de examen clínico y serológico, usando como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B. Así mismo, con la finalidad de establecer reacciones cruzadas o coinfecciones, se evaluó la reactividad de los sueros ante antígenos específicos de Trypanosoma cruzi, por medio de la prueba Western Blot (WB). La frecuencia de LVC fue del 44,1 por ciento (93/211) y 50,2 por ciento (103/211) mediante IFAT y ELISA respectivamente. Resultados La seroreactividad ante antígenos específicos de T. cruzi fue del 1,42 por ciento (3/211). La concordancia de las técnicas serológicas fue baja (K=12,1 por ciento) y a pesar de la presencia de signos clínicos en los animales evaluados, las razones de prevalencia halladas, demostraron que no hay asociación entre la ocurrencia de las manifestaciones clínicas y la seropositividad a las pruebas diagnósticas. Conclusiones La baja asociación de las pruebas serológicas utilizadas en el diagnóstico de Leishmania infantum, sugiere que es necesario desarrollar estudios que permitan establecer un algoritmo de pruebas diagnósticas en el país para confirmar el estado real de la infección de los animales y de esta forma orientar eficientemente los recursos de Salud Pública destinados al control de la enfermedad.

Objectives Establishing indirect immunofluorescence (IFAT) and enzyme-inked immunoassay (ELISA) serological tests' ability to detect canine visceral leishmaniasis (CVL) infection. Methods 211 cross-bred dogs from the south of the Tolima department (a visceral leishmaniasis endemic area) were evaluated by clinical and serological exams, using the Colombian Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B strain as antigen. Sera reactivity to Trypanosoma cruzi- specífic antigens was evaluated by Western blot (WB) for establishing crossed-reactions or coinfections. CVL frequency was 44 ,1 percent (93/211) by IFAT and 50,2 percent (103/211) by ELISA. Results Seroreactivity to T. cruzi-specific antigens was 1 ,42 percent (3/211). Agreement between the serological techniques was low (K=12 ,1 percent) and, in spite of clinical signs being present in the animals being evaluated, the prevalence ratios found demonstrated the lack of association between the occurrence of the clinical manifestations and the diagnostic tests' seropositivity. Conclusions The low association between the serological tests used in diagnosing Leishmania infantum suggested the need for further studies aimed at establishing an algorithm for diagnostic tests in Colombia for confirming the real state of the animals' infection and thereby efficiently orientating public health resources allocated for controlling canine visceral leishmaniasis.